Nota técnica

  • Estudio de la flora bacteriana secundaria en el distemper y la sensibilidad a los antibióticos

Resumen

Se hizo un estudio microbiológico en caninos con diagnóstico clínico de distemper de un total de 26 muestras de secreción ocular y 24 de secreción nasal.

El estudio bacteriológico permitió el aislamiento de 58 cepas bacterianas con carácter patógeno que correspondieron a las siguientes especies: Staphylo­coccus aureus (39); Streptococcus zooepidemicus (8); Klebsiella pneumoniae (8) y Bordetella bron­chiseptica (3).

La sensibilidad 'in vitro' de las especies bacte­rianas respecto a: gentimicina, ampicilina, cloran­fenicol, doxiciclina, tetraciclina, eritromicina, lin­comicina y oxaciclina indicó que el antibiótico más efectivo fue la gentamicina mientras que la tetraci­clina fue el de menor actividad.

Abstract

A microbiological study was done on 50 dogs with distemper disease clinically diagnosed. Fifty eight strains of pathogenic bacteria were found. These were: Staphylococcus aureus (39), Streptococcus zooepidemicus (8), Klebsiella Pneumoniae (8) and Bordetella bronchiseptica (3).

'In vitro' sensibility studies demonstrated that gentamycine was the most efficient antibiotic, while tetracycline was the least effective.

Abstract

Se hizo un estudio microbiológico en caninos con diagnóstico clínico de distemper de un total de 26 muestras de secreción ocular y 24 de secreción nasal.

El estudio bacteriológico permitió el aislamiento de 58 cepas bacterianas con carácter patógeno que correspondieron a las siguientes especies: Staphylo­coccus aureus (39); Streptococcus zooepidemicus (8); Klebsiella pneumoniae (8) y Bordetella bron­chiseptica (3).

La sensibilidad 'in vitro' de las especies bacte­rianas respecto a: gentimicina, ampicilina, cloran­fenicol, doxiciclina, tetraciclina, eritromicina, lin­comicina y oxaciclina indicó que el antibiótico más efectivo fue la gentamicina mientras que la tetraci­clina fue el de menor actividad.

Abstract

A microbiological study was done on 50 dogs with distemper disease clinically diagnosed. Fifty eight strains of pathogenic bacteria were found. These were: Staphylococcus aureus (39), Streptococcus zooepidemicus (8), Klebsiella Pneumoniae (8) and Bordetella bronchiseptica (3).

'In vitro' sensibility studies demonstrated that gentamycine was the most efficient antibiotic, while tetracycline was the least effective.

Contenido

El distemper canino es una enfermedad viral en cuya signología (conjuntivitis, rinitis, etc.) partici­pa la flora bacteriana secundaria. Los escasos tra­bajos sobre el tema hacen referencia a la importan­cia de Bordetella bronchiseptica en el síndrome respiratorio del canino (McCandlish y Cols., 1978). Wright y Cols. (1979) aislan esta especie bacteriana de caninos con bronconeumonía secun­daria a distemper y reproducen experimentalmente signos clínicos de una enfermedad respiratoria (tos y rinitis purulenta bilateral) en cuatro de cinco cachorros.

En nuestro país, Abalos y Cols. (1965), en un trabajo relacionado con el tema, aunque no estudian la sensibilidad de las especies bacterianas aisladas de cultivos puros, sino que lo hacen a través de la siembra directa de la muestra en agar sangre, en­contraron que Staphylococcus aureus fue la especie bacteriana más frecuente.

La alta incidencia del distemper clínico en nues­tro medio hace necesario estudiar en forma periódi­ca las diversas especies microbianas implicadas en este proceso, como así mismo la sensibilidad de ellas frente a los antibióticos de uso más frecuente.

Material y métodos

El trabajo se realizó en 50 caninos con diagnóstico clínico de distemper efectuado en el Policlínico de Especies Menores de la Escuela de Ciencias Veteri­narias. Los animales no habían recibido tratamiento previo.

Las muestras se obtuvieron mediante tórula esté­ril: 26 de ellas correspondieron a secreción ocular y 24 a secreción nasal.

Las observaciones microscópicas se hicieron en preparaciones teñidas por el método de Gram. Para aislar las especies bacterianas aerobias se sembró por diseminación en agar sangre de ovino al 3% y para bacterias anaerobias en agar anaerobio Brewer (Fischer Scientific), incubándose las siem­bras a 37°C durante 48 horas.

Las colonias desarrolladas se estudiaron macro y microscópicamente y luego se procedió a sembrar las cepas en medios de cultivos diferenciales para estudiar las propiedades bioquímicas.

La identificación final de especie se hizo en base a los caracteres macro y micromorfológicos y pro­piedades bioquímicas de acuerdo a Buchanan y Gibbon (1974).

El estudio de la sensibilidad 'in vitro' de las especies bacterianas identificadas se realizó según el método de difusión del antibiótico en agar. Se utilizó agar de Mueller-Hinton con sangre como medio de cultivo y sensi discos (BBL). Los resulta­dos se leyeron a las 24 horas de incubación a 37°C. La sensibilidad se estudió frente a los antibióticos siguientes: gentamicina, doxiciclina, oxacilina, eri­tromicina, cloranfenicol, ampicilina, lincomicina y tetraciclina.

Resultados

El estudio microbiológico realizado en muestras de secreción ocular y nasal de caninos con diagnósti­cos clínico de distemper permitió el aislamiento de 58 cepas bacterianas a las que se les puede atribuir rol patógeno.

La especie bacteriana aislada más frecuente fue Staphylococcus aureus (67,24%), seguida de Streptococcus zooepidemicus y Klebsiella pneumo­niae, ambas en un 13,79%.

En el cuadro 1 se aprecia la distribución y núme­ro de especies bacterianas de acuerdo a la proceden­cia de la muestra.

CUADRO 1 ESPECIES BACTERIANAS AISLADAS SEGÚN ORIGEN DE LA MUESTRA

-

Secreción ocular

Secreción nasal

Total

N° Muestras

%

N° Muestras

%

Muestras

Staphylococcus Aureus

17

65,38

15

62,50

32

Streptococcus Zooepidemicus

4

15,38

-

-

4

Klebsiella Pneumoniae

1

3,85

3

12,50

4

Bordetella Bronchiséptica

-

-

2

8,33

2

St. Aureus + St. Zooepid.

3

11,54

-

-

3

St. Aureus + K. Pneumoniae

1

3,85

2

8,33

3

St. Aureus + B. Bronchiséptica

-

-

1

4,17

1

Str. Zooepid. + K. Pneumoniae

-

-

1

4,17

1

Total

26

-

24

-

50

En secreción ocular la especie más frecuente fue Staphylococcus aureus como agente único en un 65,38% y asociado a otra espe­cie bacteriana en un 15,37%.

En cuanto a secreción nasal el mayor porcentaje corresponde también a Staphylococcus aureus co­mo especie única en 62,50% y asociada en un 12,49%.

El cuadro 2 muestra la distribución de las espe­cies bacterianas Gram positivas y la sensibilidad a los antibióticos. En él podemos apreciar que Strep­tococcus zooepidemicus mostró 100% de sensibili­dad frente a los diferentes antibióticos, mientras que la sensibilidad de Staphylococcus aureus fue variable, siendo mayor la gentamicina 97,43%, se­guido de doxiciclina 89,74% y oxacilina con 87,17%. Además se expone la sensibilidad de las especies Gram negativas frente a cinco antibióticos. Se puede observar que la sensibilidad es muy varia­ble, excepto frente a gentamicina que muestran 100% de sensibilidad.

CUADRO 2 SENSIBILIDAD DE LAS ESPECIES BACTERIANAS GRAM NEGATIVAS (-) Y GRAM POSITIVAS (+) A DIFERENTES ANTIBIÓTICOS SENSIBILIDAD (%)

-

SENSIBILIDAD (%)

Total Gram (+) (47 cepas)

St. Aureus (39 cepas)

Streptoc. Zooepidem. (8 cepas)

Total Gram (-) (11 cepas)

Bordetella (3 cepas)

Klebsiella (8 cepas)

Gentamicina

97,87

97,43

100

--100

100

100

Doxicilina

91,48

89,74

100

54,54

66,66

50

Oxicilina

89,36

87,17

100

-

-

-

Eritromicina

85,10

79,48

100

-

-

-

Cloranfenicol

82,97

79,48

100

81,81

100

75

Ampicilina

70,21

64,10

100

54,54

100

50

Lincocin

85,95

58,97

100

-

-

-

Tetraciclina

59,57

51,28

100

18,18

66,66

12,50

Discusión

En el distemper canino el fracaso del tratamiento según nuestra experiencia podría deberse en primer término a que esta infección secundaria general­mente es mixta o polimicrobiana y está constituida, en gran parte, por especies bacterianas que presen­tan sensibilidad muy variable frente a los diversos antibióticos.

Si comparamos nuestros resultados con los obte­nidos por Abalos y Cols. (1965), podemos observar que Staphylococcus aureus mantiene su primacía en cuanto a frecuencia, aun cuando el porcentaje de cepas encontradas en el trabajo mencionado fue superior (83,0%) al nuestro (67,24%).

La presencia de Staphylococcus aureus en ambos tipos de muestra fue similar: 65,38% en secre­ción ocular y 62,50% en secreción nasal.

Cabe destacar el aislamiento de Klebsiella pneu­moniae en ocho de las muestras examinadas, espe­cie bacteriana no encontrada por Abalos y Cols. (1965). Llama la atención que Bordetella bronchi­septica estuviese presente en tres muestras de secre­ción nasal; esta especie tampoco fue aislada en el trabajo recién mencionado, lo cual reviste especial importancia si consideramos la patogenicidad de esta especie demostrada por Wright y Cols. (1973) al inocular experimentalmente cultivos puros en cachorros, logrando reproducir algunos de los sig­nos clínicos que se presentan en el distemper. El porcentaje de Bordetella bronchiseptica aisladas fue pequeño 5,17% si lo comparamos con el encon­trado por Mc. Candlish y Cols. (1978), que fue de 45,5% con muestras obtenidas de animales sacrifi­cados.

En cuanto a la sensibilidad de las especies bacte­rianas aisladas frente a los antibióticos empleados, Staphylococcus aureus presentó un 79,48% de sen­sibilidad frente al cloranfenicol en comparación al 52,6% obtenido por Abalos y Cols. (1965). Por otra parte frente a eritromicina mostró un 79,48%, en cambio en el trabajo antes mencionado fue de 83,3%. Con respecto a tetraciclina el porcentaje de sensibilidad (51,28%) fue mayor al obtenido por Abalos y Cols. (1965) (15,5%). Estas diferencias podrían deberse a la metodología diferente ya que Abalos y Cols. (1965) hacen el antibiograma a partir de la muestra como tal, en cambio en este estudio fue con la especie bacteriana aislada en cultivo puro.

Otro aspecto que debemos destacar es el 100% de sensibilidad que muestra Streptococcus zooepi­demicus frente a los ocho antibióticos analizados en el trabajo. El más efectivo frente a Staphylococcus aureus fue la gentamicina (97,43%) y el menos activo la tetraciclina (51,28%). La alta efectividad de la gentamicina podría explicarse por la reciente incorporación de este antibiótico en la práctica de la Clínica Menor.

Con respecto a las especies bacterianas Gram negativas, Klebsiella pneumoniae presentó 100% de sensibilidad frente a gentamicina. Este hecho se debería a la misma causa señalada al referirnos a Staphylococcus aureus. En segundo lugar de efecti­vidad se ubicaría el cloranfenicol (75%) y finalmen­te tetraciclina (12,5%). Este último porcentaje es similar al encontrado por Schassan y Cols. (1978), quienes concluyen que la mayoría de la klebsielas eran resistentes a tetraciclina.

La otra especie Gram activa aislada, Bordetella bronchiseptica mostró 100% de sensibilidad frente a gentamicina, cloranfenicol y ampicilina: en cam­bio la sensibilidad con respecto a doxiciclina y tetraciclina fue considerablemente menor para am­bos antibióticos (66%).

En general debemos destacar que en nuestro trabajo, el antibiótico que mostró más efectividad frente a bacterias Gram positivas y Gram negativas fue la gentamicina.

La doxiciclina resultó ser más efectiva contra especies Gram positivas (91,48%) que frente a las especies Gram negativas (54,54%).

La efectividad del cloranfenicol contra las espe­cies Gram positivas y Gram negativas fue similar, 82,97% y 81,81%, respectivamente. En cambio la ampicilina fue más efectiva contra las bacterias Gram positivas (70,21%) que para las Gram negati­vas (54,54%).

Referencias

ABALOS, P.; ALEGRÍA, G.; HEBEL, P. Sensibilidad a los antibióti­cos de la flora bacteriana secundaria en el Distemper. Bol. Sexta Convención Nacional de Médicos Veterinarios de Chi­le, Viña del Mar, 26-28 agosto, 1965.

BUCHANAN y GIBBON. Bergey's Manual of determinative bacte­riology, 8a Edición, 1974.

MC. CANDLISH, I.A.P.; THOMPSON, H.; WRIGHT, N.G.; CORNE­WEL, J.C. A study of dogs with kennel cough. Vet. Rec.102: 298-301, 1978.

SCHASSANN, H.; STENGEL, W. FEDDER, J. The antibacterial acti-vity of doxicycline in comparision with two other tetracycli­ne. Zentralbl. Bakteriol. Parasitnkd, Infektionskr. Hyg. I Abt. A. 238: 263-272, 1977. (Original no consultado, com­pendiado en Microb. Abstracts Vol. XIII N° 1: 101, 1978).

WRIGHT, N.C.; THOMPSON, H.; CORNEWEL, J.C.; TAYLOR, D. Bordetella bronchiseptica a re-assessment of its role in cani­ne respiratory disease. Vet. Tec. 93: 486-487, 1973.

Recibido julio 1986, aceptado octubre 1986.