Trabajos Originales

  • Prevalencia de anticuerpos anti reovirus tipo 1, 2 y 3 y virus influenza A/equi-1 y A/equi-2 en equinos del Jockey Club de Pelotas, Río Grande do Sul, Brasil.

Resumen

 Se estudió la presencia de anticuerpos séricos frente a los reovirus 1, 2 y 3 y de los virus influenza A/equi-1 y A/equi-2 en los equinos del Jockey Club de Pelotas. Se realizó la prueba de inhibición de la hemoaglut¡nación (micrométodo). El serotipo 3 del reovirus presentó mayor prevalencia (P < 0,01). Se detectó mayor prevalencia de animales con más de 5 años de edad reaccionando con los tres serotipos del reovirus simultáneamente, y las variaciones de las prevalencias pueden explicarse por el incremen­to de la edad (Y = 9,43 + 5,42 x, R2 = 0,84% P < 0,05). No se observó relación entre sexo y preva­lencia para ningún serotipo de reovirus. Las preva­lencias para influenza fueron de 0,49% para A/ equi-1 y 0,98% para A/equi-2. Además, se aislaron dos cepas de un virus que causó un brote de enfer­medad respiratoria en la población estudiada; sin embargo, no relacionado con los reovirus y virus influenza, probablemente un rinovirus. Los resulta­dos obtenidos sugieren que los reovirus están pre­sentes en los equinos estudiados, pero no se ha demostrado su relación con enfermedad clínica. Se comprueba también que la población estudiada no presenta protección frente a la influenza equina.

 

Palabras Claves

Serología, equinos, reovirus, influenza equina

Abstract

The present work was conducted in the equipe population of the jockey club of Pelotas, RS, with the objective of determining the presence and titer of serum antibody for the type 1, 2 and 3 reovirus and the influenza virus A/equi-1 and Alequi-2. All the serum samples were examined by the hemaglutination inhibition test (micromethod).

The serotype 3 reovirus showed the highest prevalence (P < 0.01). It has been found that a higher prevalence of multiple reactions to three serotypes in animals older than 5 year of age. Eightyfour percent (84%) of the variation of the prevalence (r2 + 0.84) can be explained by the increase of age (Y = 9.43 + 5.42X, P < 0.05), but no correlation was observed between sex, serotypes and prevalence of positives. Low prevalences were observed for influenza virus serotypes Alequi-1 (0.49%) and Alequi-2 (0.98%). In an outbreak during this period, two viral strains were isolated possibly a rhinovirus. These results suggest that reoviruses are present in the horses studied, however, their relationship with respiratory disease was not confrmed. These results showed also that this population of horses is completely susceptible to the influenza viruses.

Keywords

Serology, equine, reovirus, equine influenza

Introducción

Los principales agentes virales responsables de las enfermedades respiratorias en equinos son influen­za Alequi-1 y A/equi-2, reovirus serotipos 1, 2 y 3, adenovirus equino y virus de la arteritis equina (Reinhardt col., 1983). En los últimos 15 años ha sido dispensada mayor atención a los reovirus como agentes de las enfermedades respiratorias en equinos.

La prevalencia de anticuerpos para reovirus en la población equina de países europeos tales como Alemania, Holanda, Inglaterra y Bélgica fluctuó entre 50 y 90% para el tipo 3; 7 en 43% para el tipo 2 y 4 y 28,8% para el tipo 1 (Bachman y col., 1972; Thein y Mayr, 1974; Thein y Hartl, 1977). En los Estados Unidos de Norteamérica y Canadá variaron entre 9,8 y 42,2% para el tipo 2: 8,8 a 40% para el tipo 1, y de 2 a 29% para el tipo 3 (Sturm y col., 1980; Conner y col., 1984), mientras en el sur de Chile fueron de 25,6, 12,6 y 63,9% para los tipos 1, 2 y 3 de reovirus, respectivamente (Reinhardt y col., 1983).

La influenza equina fue diagnosticada en Brasil en 1963, con aislamiento del virus A/equi-2 en un brote ocurrido en Sao Paulo (McQueen y col., cita­do por Cunha y col., 1978). La presencia de anti­cuerpos para los dos serotipos se demostró en equi­nos del Río Grande do Sul (Wizigmann y Vidor, 1969).

Brotes de enfermedad respiratoria han interveni­do en los programas de carrera de los hipódromos canadienses, presentándose sin diagnóstico etioló­gico en 30 a 60% de los casos. Situaciones similares ocurren también en el hipódromo de Pelotas.

Se plantea como objetivo del presente estudio, pesquisar anticuerpos contra los virus influenza y reovirus en la población equina del Jockey Club de Pelotas, y establecer su relación con enfermedades respiratorias..

 Con base en la tesis de Maestría del primer autor, Postgrado en Sanidad Animal. Facultad de Veterinaria, Universidad Federal de Pelotas, Río Grande do Sul, Brasil.

Material y métodos

Se obtuvieron los sueros de 204 equinos que corres­pondían a la totalidad de la población del Jockey Club de Pelotas. Los sueros fueron tratados con caolín al 12,5% (Vidor, 1973), adsorbidos con una suspensión de eritrocitos humanos del grupo '0', inactivados a 56°C por 30 minutos, y mantenidos a -20°C hasta el momento de su utilización.

Los anticuerpos fueron titulados por la prueba de inhibición de la hemoglutinación (micrométodo). Se utilizó 4 UHA de las siguientes cepas de virus*: Lang, Jones y Dearing del reovirus tipos 1, 2 y 3, respectivamente, y **A/equi-1 / Praga/ 56 y A/ equi-2/Miami/ 63 del virus influenza. Se utilizó eritrocitos de pollo para la prueba con el virus influenza y, eritrocitos humanos del grupo '0', Rh positivo, para los reovirus. Los sueros que inhibie­ron la hemaglutinación en la dilución 1:16 ó supe­rior frente a las cepas de reovirus, y 1:32 ó superior frente a los virus influenza se consideraron positi­vos (Bachman y col., 1972). Se tomaron muestras de secreción nasal de 13 animales que presentaron enfermedad respiratoria en este período. Se inocu­laron las muestras en embriones de pollo con 9 días de incubación, líneas celulares *VERO y RK- 13, y ratones lactantes con 17 días de edad.

_________

Notas

*

Cepas de los virus y líneas celulares cedidas por el Instituto de Pesquisa Veterinaria Desiserio Finamor, P6rto Alegre, Río Grande do Sul, Brasil.

**

Cepas de los virus cedidas por el Dr. Raimundo Diogo Machado, Universidad Federal de Río de Janeiro, Brasil.

 

Resultado

Los resultados obtenidos en las pruebas serológicas con reovirus muestran una prevalencia de 88,7% para el serotipo 3, significativamente mayor que para los demás serotipos (P < 0,01) (cuadro 1).

CUADRO 1 SUEROS DE EQUINOS REACCIONANTES A REOVIRUS DISTRIBUIDOS SEGÚN TÍTULO  INHIBIDOR DE LA HEMOAGLUTINACIÓN Y SEROTIPO

--

Títulos de Anticuerpos

Total Sueros Positivos

Total Muestras

Serotipo

16

32

64

128

256

512

N

%

N

1

142

30

24

5

1

1

1

62

30.39

204

2

152

36

12

4

-

-

-

52

25.49

204

3

23

39

95

43

4

-

-

181

88.73

204

Las prevalencias frente a cada serotipo, de acuerdo con sexo, se presentan en el cuadro 2.

CUADRO 2 SUEROS DE EQUINOS POSITIVOS A REOVIRUS DISTRIBUIDOS SEGÚN SEXO Y SEROTIPO

Sexo

Serotipo

Macho

Hembra

%

%

%

1

38

29,69

24

31,58

2

31

24.22

21

27.63

3

114

89.06

67

88.16

Total sueros

128

-

76

-

En el cuadro 3 se presenta la reacción frente a los serotipos 1, 2 y 3 de reovirus en relación con la edad de los animales. Se pudo notar un mayor porcentaje de animales jóvenes reaccionando con un solo sero­tipo de reovirus, y con los tres serotipos el mayor porcentaje se presentó en los animales con más de 5 años. Se detectó una relación entre la prevalencia de animales con serología positiva frente a los tres serotipos de reovirus simultáneamente y la edad, representada por la ecuación y = -9,43 + 5,42 X (R2 = 0,84 P < 0,05) (figura 1).

CUADRO 3 SUEROS DE EQUINOS REACCIONANTES A LOS SEROTIPOS 1, 2 Y 3 DE REOVIRUS SEGÚN EDAD DE LOS ANIMALES

-

Negativos

Positivos

Edad (años)

%

Serotipo : %

Serotipo 2 %

Serotipo 3 %

2

6.06

69.70

24.24

0,00

3

10.45

49.25

29.85

10.45

4

3.77

52.83

35.85

7.55

5

8.70

34.78

34.78

21.74

> 6

10.71

39.29

28.57

21.43

Figura 1. prevalencia de sueros positivos frente a los tres serotipos de reovirus según edad de los equinos.

Para el serotipo 2 de reovirus el título fue afecta­do por la edad.

Las prevalencias obtenidas para el virus influen­za se describen en el cuadro 4.

CUADRO 4 SUEROS DE EQUINOS NEGATIVOS, SOSPECHOSOS Y POSITIVOS PARA LOS VIRUS INFLUENZA EQUINA SEGÚN SEROTIPO

Serotipo

Negativo

Sospechoso

Positivo

Total Muestra

A Equi/ 1

200

98.00

3

1,40

1

0,49

204

A Equi/2

200

98.00

2

0,98

2

0,98

204

Negativo: Titulo IHA  8 Sospechoso: Titulo IHA 16 Positivo: Titulo IHA  32

Dos muestras de exudado nasal que se obtuvie­ron de equinos produjeron efecto citopático con arrendondamiento de células VERO y RK 13, mientras que laminillas de las dos líneas celulares teñidas con hematoxilina - eosina no mostraron ningún tipo de inclusión celular. No se observó efecto posterior a la inoculación en embriones de pollos y ratones. Reducción de la inefectividad de las dos muestras aisladas resultó por su congelación y descongelación. Por las características de cultivo que presentan y enfermedad clínica producida, sugieren una probable infección con rinovirus.

Discusión

Poco se sabe sobre los reovirus con respecto a su prevalencia, pérdidas que resultan por la infección, y cuál es su importancia del punto de vista de patogenicidad para los equinos. En la población equina del Brasil no se utilizan vacunas contra ello, por lo tanto la simple constatación de anticuerpos en los animales es indicativo de la infección.

Los resultados obtenidos en el presente estudio serológico señalan el Serotipo 3 (88,73%) del reovi­rus como el más prevalente en esta población, se­guido de los serotipos 1 (30,39%) y 2 (25,49%), lo que concuerda con la mayoría de los trabajos reali­zados en Europa y América del Sur, donde estos serotipos presentan el mismo orden de prevalencia: primero el tipo 3 (50 a 63,9%), seguido por el tipo 1 (23 a 28,8%) y el tipo 2 (7 a 12,6%) (Bachman, y col., 1972; Thein y Mayr, 1974; Echeverría, 1979; Reinhardt y col., 1983). Los resultados encontra­dos por Thein y Hartl (1977) en Alemania señalan al tipo 3 como el de mayor prevalencia, mientras que las prevalencias para los tipos 2 y 1 fueron simi­lares.

En Norteamérica, Sturm y col. (1980) encontra­ron en Canadá una mayor prevalencia para el tipo 1, mientras que en Nueva York, Conner y col. (1984) mostraron la mayor prevalencia para el tipo 2.

Los resultados presentados en el cuadro 2 muestran que el sexo no ha influido en la prevalencias encontradas, aunque para Reinhard y col(1983) las hembras presentaron un 10% más para el seroti­po 1.

Reinhardt y col. (1983) sugirieron la posibilidad de un incremento de las infecciones reovirales múl­tiples con el aumento de la edad. Nuestras observa­ciones señalan una mayor prevalencia de infeccio­nes simultáneas con los tres serotipos en los anima­les con más de 5 años, la figura 1 muestrá esta prevalencia estimada por la ecuación de regresión linear.

No se pudo relacionar la enfermedad clínica con reovirus, además de los resultados de altos títulos de anticuerpos y de elevada prevalencia, esto sugie­re que la población presenta una cierta inmunidad para los reovirus.

Considerándose los títulos de anticuerpos pro­tectores contra influenza equina en la prueba de inhibición de la hemaglutinación de 40 para A/equi­1 (Bryans y col., 1966) y de 80 para A/equi-2 (Rouse y Ditchfield, 1970), se pudo concluir que la población estudiada no presenta protección.

El cuadro de enfermedad clínica observado pro­bablemente fue causado por las cepas del virus en estudio.

Los resultados obtenidos muestran que las enfer­medades respiratorias en equinos de nuestra región no son producidas sólo por los virus influenza ob­servados en epizootias en años anteriores. Los estu­dios de los períodos interepizoóticos son importan­tes para aclarar la participación de otros virus que determinan cuadros clínicos semejantes en estos equinos.

Referencias

BACHMAN, P.A., G. HARTI, P. THEIN, B. BIBRACK, T. MAYR. Uber das vorkommen and die verbreitung von virusarten beim pferd in der Bundes Republik Deutsehland, die bei respiratosischen Erkrankungen mitbeteiligt sein Kónnen. Zbl. Vet. Med. B., 19: 801-813, 1972.

BRYANS, S.T., E.R. DOLL, J.C. WILSON, W.H. MCCOLLUM. Inmunization for equine influenza. J. Am. Vet. Med. Assoc. 148: 413-417, 1966.

CONNER, M.A., A. KALICA, J. KITA, S. QUICK, E. SCHIFF, J. JOUBERT, J. GILLESPIE. Isolation and characteristics of an equine reovirus type 3 and an antibody prevalence survey to reoviruses in horses located in New York State. Vet. Micro­biol. 9: 15-25, 1984.

CUNHA, R., W.S. PASSOS, M.C.C. Do VALLE. Surto de gripe equina produzido por virus de influenza A/equi-1 no estado de Rio de Janeiro, Brasil. Rey,. Brasil. Biol. 38: 549-54, 1978.

REINHARDT, C., M. POLETTE, J.R. YÉVENES. Estudio serológico de reovirus en equinos en dos regiones del sur de Chile. Zbl. Ver. Med. B. 30: 195-202, 1983.

ROUSE, B.T., J. B. DITCHFIELD. The response of ponies to Myxo­virus influenza A/equi-2. The protective effect of serum and nasal antibody against experimental challenge. Res. Vet. Sci. 11: 503-507, 1970.

STEEL, R.G.D., J.H. TORRIE. Prineiples and proeedures of watistics. Second edition, New York, McGraw-Hill Book, 1980, p. 633.

STURM, R.T., G.H. LANG, W.R. MITCHELL. Prevalenceofreovi­rus I , 2 and 3 antibodies in Ontario racehorses. Can. Vet. J. 21: 206-209, 1980.

THEIN, P., G. HARTL. Untersuchungen zur virusátiologie respi­ratorischer. Erkrankungen des pferdes. Prak. Tierarzt. 58: 24-29,1977.

THEIN, P., A. MAYR. Studies on the significance of reovirus infections in respiratory diseases of horse. Zbl. Vet. Med. B. 21: 219-233, 1974.

VIDOR, T. Vergleichende untersuchungen überdie inaktivierung von reovirus, serotype 1, unter erhalt der immunisierenden eigenschaften. Inaugural dissertation. Universidad Ludwig­Maximilians, Munchen, Deutsehland, 1973.

WIZIGMANN, G., T. VIDOR. Pesquisa de anticorpos para influen­za equina no Río Grande do Sul. Instituto de Pesquisa Veteri­naria Desiderio Finamor, RS, Brasil, 11, 1969.

Recibido el 3 de noviembre de 1989, aprobado el 7 de marzo de 1990.